U decembru 2019. započeo je niz slučajeva upale pluća nepoznatog uzroka iz Wuhana u provinciji Hubei i uskoro se proširio na većinu provincija i gradova u Kini i mnogim drugim zemljama u januaru 2020. Od 22:00 sata 27. januara u Kini je prijavljeno 28 potvrđenih slučajeva i 5794 sumnjivih slučajeva 2019-nCov. Theizvor infekcije virusa zaključen je kao Rhinolophus, a trenutna stopa smrtnosti je 2,9%.
Svjetska zdravstvena organizacija (WHO) objavila je 12. januara 2020. godine da je epidemiju upale pluća uzrokovala nova vrsta koronavirusa (2019-nCov). Koronavirus je vrsta virusa koji se širi među životinjama. Tip nukleinske kiseline virusa je jednolančana RNK. U isto vrijeme, WHO je također objavio informacije o sekvenci nukleinske kiseline nCov koje su podijelili kineski naučnici, što je pružilo osnovu za molekularnu detekciju za otkrivanje virusa i omogućilo brzo otkrivanje i identifikaciju patogena.
SZO predlaže da se ljudi koji imaju akutne respiratorne bolesti poput kašlja, groznice, infekcije respiratornog trakta i koji su bili u Wuhanu u roku od 14 dana ili su bili izloženi kontaktu s drugim pacijentima, trebaju biti sveobuhvatno testirani. SZO je 17. januara 2020. objavila „Laboratorijsko testiranje na novi koronavirus 2019. (2019-nCoV) u sumnjivim slučajevima ljudi, privremene smjernice, 17. januara 2020.“ Smjernice ističu da uzorci koje treba prikupiti od simptomatskih pacijenata uključuju respiratorne uzorke (brisevi iz nazofarinksa i orofaringeusa, ispljuvak, ispiranje bronhoalveola itd.) I uzorke seruma, kako slijedi:
*Za transport uzoraka za detekciju virusa koristite VTM (medij za prijenos virusa) koji sadrži antigljivične i antibiotske suplemente. Za bakterijsku ili gljivičnu kulturu transportirajte suhu ili u vrlo maloj količini sterilne vode. Izbjegavajte ponovljeno zamrzavanje i odmrzavanje uzoraka.
Osim specifičnih materijala za prikupljanje navedenih u tablici, osigurajte da su dostupni i drugi materijali i oprema: npr. Transportni kontejneri i vreće i ambalaža za prikupljanje uzoraka, hladnjaci i hladni oblozi ili suhi led, sterilna oprema za vađenje krvi (npr. Igle, špricevi i cijevi), etikete i trajni markeri, OZO, materijali za dekontaminaciju površina.
Za otkrivanje virusa, uzorci seruma mogu se koristiti za otkrivanje virusa imunološkom metodom, dok se RTqPCR preporučuje za otkrivanje nCov nukleinske kiseline radi brže i preciznije detekcije. Kao virus
sekvenca je poznata, samo sadržaj virusne nukleinske kiseline u uzorku može se brzo otkriti
odabir odgovarajućih reagensa i odgovarajućih prajmera
(Dijagnostičko otkrivanje koronavirusa Wuhan 2019 putem RTPCR-a u stvarnom vremenu, Protokol i preliminarna procjena od 13. januara 2020.) Kao lider u području ekstrakcije i detekcije nukleinskih kiselina u Kini, TIANGEN BIOTECH (BEIJING) CO., LTD. je osigurao reagense za detekciju virusa šapa-usta-usta i virusa influence A (H1N1) za više od 10 miliona ljudi. U 2019. godini, TIANGEN -ovi reagensi za ekstrakciju i detekciju nukleinske kiseline virusa primijenjeni su na 30 miliona uzoraka afričke klasične svinjske kuge, dajući izvanredan doprinos dijagnostici i prevenciji afričke klasične svinjske kuge u Kini. TIANGEN ne samo da nudi brze i precizne reagense za ekstrakciju i detekciju virusa, već također nudi prikladne i efikasne instrumente za mljevenje tkiva i automatske ekstraktore nukleinskih kiselina, koji čine kompletan skup rješenja za ekstrakciju i detekciju virusa.
Automatizirano rješenje za ekstrakciju nukleinske kiseline
TIANGEN Automatizirani ekstraktori nukleinske kiseline su automatske platforme za ekstrakciju nukleinske kiseline metodom magnetskih kuglica. Primjena ovih platformi ne samo da značajno smanjuje opterećenje inspekcijskih i karantenskih odjela, već također smanjuje i operativne greške ručne ekstrakcije, te osigurava konzistentnost i stabilnost kvalitete ekstrahirane nukleinske kiseline.
TIANGEN Automatizirani ekstraktor nukleinske kiseline ima različite protoke (uključujući 16, 24, 32, 48, 96 kanala), a odgovarajući reagensi mogu se koristiti za ekstrakciju nukleinske kiseline iz različitih vrsta uzoraka. TIANGEN takođe pruža prilagođene usluge razvoja reagensa i integracije instrumenata prema različitim eksperimentalnim zahtevima.
TGrinder H24 Homogenizator tkiva
● Široko se koristi za mljevenje i homogeniziranje različitih uzoraka tkiva i izmeta
● Sa silom homogenizacije brušenja 2-5 puta jačom od tradicionalnih instrumenata
● Ravnomjerno brušenje i homogenizacija, izbjegavajući unakrsnu kontaminaciju
● Automatski zaštitni uređaj za zaštitu sigurnosti laboratorijskog osoblja
TGuide S32 Automatizirani ekstraktor nukleinske kiseline
● Propusnost uzorka: 1-32 uzorka
● Zapremina prerade: 20-1000 μl
● Vrsta uzorka: Krv, ćelije, tkivo, izmet, virusi i drugi uzorci
● Vrijeme obrade: Do 8 minuta za dobijanje virusne nukleinske kiseline
● Način upravljanja: Način dvostruke kontrole Windows Pad -a i dugmeta na ekranu
● Razvoj platforme: Otvorena platforma, slobodna za odgovaranje reagensima
● TGuide S32 komplet za magnetsku virusnu DNK/RNK (DP604)
● Široka primjena: Kvalitetna DNA/RNA virusa može se pročistiti iz seruma, plazme, uzorka brisa, otopine za tretiranje tkiva i različitih otopina za očuvanje virusa.
● Jednostavan i efikasan: Ovaj proizvod savršeno je usklađen sa TGuide S32 automatizovanim ekstraktorom nukleinske kiseline, koji može izdvojiti virusnu DNK/RNK sa visokim prinosom, visokom čistoćom, stabilnim i pouzdanim kvalitetom.
● Nizvodne aplikacije: Prečišćena nukleinska kiselina je pogodna za nizvodne eksperimente virusne PCR i PCR u realnom vremenu.
Ručno rješenje za ekstrakciju nukleinske kiseline
Kao lider na području ekstrakcije i detekcije nukleinskih kiselina, TIANGEN posjeduje najopsežniju seriju proizvoda za ekstrakciju nukleinskih kiselina u Kini, koji su idealni za otkrivanje koronavirusa iz svih vrsta uzoraka: krvi, seruma/plazme, tkiva, brisa, virusa itd.
Komplet DNK/RNK virusa TIANamp (DP315)
● Visoka efikasnost: Visokokvalitetna DNK i RNK virusa mogu se dobiti brzim prečišćavanjem uz visoku ponovljivost.
● Visoka čistoća: Potpuno uklanjanje zagađivača i inhibitora za dalju primjenu.
● Visoka sigurnost: ekstrakcija organskog reagensa ili taloženje etanola nisu potrebni.
RNA rešenje za detekciju virusa
1. TEasy automatizovani sistem za pipetiranje
● Visoka preciznost: Blok za hlađenje može držati temperaturu uzorka reagensa ispod 7 ℃ duže od 60 minuta. Svaki APM je kalibriran prema međunarodnim standardima, koji imaju veću preciznost od ručnog pipetiranja.
● Jednostavno rukovanje: Male veličine. Mala težina. Za zamjenu blokova nije potreban nikakav alat. Ugrađena procedura pripreme za PCR/qPCR. Pojednostavljeni ručni rad pripreme PCR otopine.
● Široka primjena: Može se koristiti za pipetiranje ploča sa 96/384 jažica, PCR, qPCR, detekciju gena i druge eksperimente velike propusnosti.
FastKing komplet RT-qPCR u jednom koraku (sonda) (FP314)
FastKing One Step RT-qPCR Kit (sonda) (FP314) koji je razvio TIANGEN je jednostepeni komplet za kvantitativnu detekciju fluorescentne obrnute transkripcije zasnovan na metodi sonde, koji je posebno dizajniran za detekciju gena u tragovima u različitim uzorcima. KingRTase u kompletu je nova molekularno modificirana reverzna transkriptaza, koja ima jači afinitet prema RNK i toplinsku stabilnost, s poboljšanom efikasnošću reverzne transkripcije i sposobnošću produženja složenih RNA šablona sekundarne strukture. Primjenjuje se i nova Taq DNA polimeraza s vrućim startom kako bi se PCR reakciji dala veća efikasnost i specifičnost amplifikacije. Osim toga, komplet pojednostavljuje komponente u najvećoj mjeri miješanjem Taq i MLV enzima u mješavinu enzima, te predmiješanjem ionskog pufera, dNTP-a, stabilizatora PCR-a i pojačivača u MasterMix, tako da se višekomponentni koraci miješanja mogu
pojednostavljeno.
● Visoka efikasnost: Odlična reverzna transkriptaza i DNA polimeraza osiguravaju visoku efikasnost reakcije
● Dobra reverzibilnost: Polimeraza može čitati kroz RNA šablon sa visokim sadržajem GC i složenom sekundarnom strukturom
● Široke primene: Visoka primenljivost na RNK šablone sa nečistoćama iz različitih vrsta
● Visoka osjetljivost: Predlošci od samo 1 ng mogu se točno identificirati, posebno za šablone male količine
Primjer za detekciju virusa RNA
Nukleinska kiselina H5 ptičje gripe ekstrahirana je kompletom TGuide S32 Magnetic Viral DNA/RNA Kit (DP604). FastKing One Step RT-qPCR Kit (sonda) (FP314) korišten je za detekciju RT-qPCR-a pomoću specifičnih primera i sondi za ptičiji grip H5.
ABi7500Fast je korišten za otkrivanje RT-qPCR-a. Rezultati antigena virusa influence ptica H5 (razrjeđenje 10-2, 10-3, 10-4, 10-5, 10-6 i 10-7) iz uzoraka od 200 μl pokazuju visok prinos ekstrakcije nukleinske kiseline virusa, koji može zadovoljiti sljedeće potrebe obrnute transkripcije, PCR, RT-PCR, PCR u realnom vremenu, itd. PCR u stvarnom vremenu daje rezultate s visokom osjetljivošću, dobrom ponovljivošću i dobrom linearnošću razrjeđenja gradijenta. Mogu se precizno otkriti različite koncentracije uzoraka virusne nukleinske kiseline.
Vrijeme objave: april-11-2021
