TGuide S32 Komplet magnetske DNK krvi

A-1 Niska koncentracija ćelija ili virusa u početnom uzorku-Obogatite koncentraciju ćelija ili virusa.

A-2 Nedovoljna liza uzoraka-Uzorci nisu dobro pomiješani s puferom za lizu. Predlaže se temeljito miješanje pulsirajućim vrtloženjem 1-2 puta. - Nedovoljna liza ćelija uzrokovana smanjenjem aktivnosti proteinaze K. - Nedovoljna liza ćelija ili razgradnja proteina zbog nedovoljnog vremena toplog kupanja. Predlaže se da se tkivo izreže na male komade i produži vrijeme kupanja kako bi se uklonili svi ostaci u lizatu.

A-3 Nedovoljna adsorpcija DNK. —Ne je dodan etanol ili niskoprocentni umesto 100% etanola pre nego što je lizat prebačen u centrifugalnu kolonu.

A-4 pH vrijednost pufera za ispiranje je preniska. -Podesite pH na između 8,0-8,3.

Ostatak etanola u eluentu.

—U eluentu je preostali pufer za ispiranje PW. Etanol se može ukloniti centrifugiranjem centrifugirane kolone 3-5 minuta, a zatim staviti na sobnu temperaturu ili inkubator od 50 for 1-2 minute.

A-1 Uzorak nije svjež. —Izvucite pozitivnu DNK uzorka kao kontrolu kako biste utvrdili je li DNK u uzorku degradirana.

A-2 Neispravan predtretman. - Uzrokovano prekomjernim mljevenjem tekućeg dušika, povratkom vlage ili prevelikom količinom uzorka.

Predtretmani bi se trebali razlikovati za različite uzorke. Za uzorke biljaka, temeljito ih sameljite u tekućem dušiku. Za uzorke životinja homogenirajte ili temeljito sameljite u tekućem dušiku. Za uzorke sa staničnim zidovima koje je teško razbiti, poput G+ bakterija i kvasca, predlaže se upotreba lizozima, litikaze ili mehaničkih metoda za razbijanje staničnih zidova.

4992201/4992202 Kit biljne genomske DNK usvaja metodu zasnovanu na koloni koja zahtijeva hloroform za ekstrakciju. Posebno je pogodan za različite uzorke biljaka, kao i biljni suhi prah. Hi-DNAsecure Plant Kit je također baziran na koloni, ali bez potrebe za ekstrakcijom fenola/kloroforma, što ga čini sigurnim i netoksičnim. Pogodan je za biljke s visokim sadržajem polisaharida i polifenola. 4992709/4992710 DNAquick Plant System usvaja metodu na bazi tečnosti. Ekstrakcija fenola/kloroforma također nije potrebna. Postupak pročišćavanja je jednostavan i brz, bez ograničenja za početne količine uzorka, tako da korisnici mogu prilagoditi količinu fleksibilno prema eksperimentalnim zahtjevima. Velike veličine fragmenata gDNA mogu se dobiti s visokim prinosom.

Genomska DNK je ekstrahovana iz različitih količina uzoraka ljudske pune krvi pomoću TIANamp Blood DNA Kit. Rezultati su sljedeći. Rezultati su navedeni samo kao referenca, stvarni rezultati ekstrakcije ovise o uvjetima uzoraka.

Ekstrakcija DNK krvnog ugruška može se izvesti korištenjem reagensa iz ova dva seta jednostavnom promjenom protokola prema specifičnim uputama za ekstrakciju DNK krvnog ugruška. Softverska kopija protokola ekstrakcije DNK krvnog ugruška može se izdati na zahtjev.

Svježi uzorak suspendirajte s 1 ml PBS -a, normalne fiziološke otopine ili TE pufera. Potpuno homogenizirajte uzorak homogenizatorom i sakupite talog na dno epruvete centrifugiranjem. Odložite supernatant i ponovo suspendirajte talog sa 200 μl pufera GA. Sljedeće pročišćavanje DNK može se izvršiti prema uputama.

Za pročišćavanje gDNA u uzorcima plazme, seruma i tjelesnih tekućina preporučuje se TIANamp Micro DNA Kit. Za pročišćavanje gDNA virusa iz uzoraka seruma/plazme preporučuje se TIANamp Virus DNA/RNA Kit. Za pročišćavanje bakterijske gDNA iz uzoraka seruma i plazme preporučuje se TIANamp Bacteria DNA Kit (lizozim treba uključiti za pozitivne bakterije). Za uzorke sline preporučuje se Hi-Swab DNA Kit i TIANamp Bacteria DNA Kit.

Za ekstrakciju genoma gljiva preporučuju se DNAsecure Plant Kit ili DNAquick Plant System. Za ekstrakciju genoma kvasca preporučuje se TIANamp komplet DNK kvasca (litikazu treba pripremiti samostalno).